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恭賀第33屆國際高速成像與光子學(xué)會議盛大召開(II)—sCMOS相機(jī)在細(xì)胞與生物成像領(lǐng)域應(yīng)用
第33屆國際高速成像與光子學(xué)會議16日在深圳盛大開幕,會議匯集全球前沿成像技術(shù)的最新進(jìn)展。上期介紹了sCMOS相機(jī)在X射線閃爍體成像、計算成像和高能物理領(lǐng)域中的應(yīng)用,本期將聚焦生物醫(yī)學(xué)中細(xì)胞與生物成像領(lǐng)域,結(jié)合中科君達(dá)視界自研的千眼狼Gloria系列sCMOS相機(jī)相關(guān)實踐驗證,分享SIM超分辨率成像,單分子熒光成像、寬場熒光成像中的典型應(yīng)用。

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1SIM超分辨率成像

傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡受制于衍射極限,難以清晰呈現(xiàn)100nm尺度的細(xì)胞精細(xì)結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)光照明顯微SIM是一種寬場超分辨成像技術(shù),通過空間調(diào)制照明與頻域重建算法,可將空間分辨率提升至~100nm,應(yīng)用于細(xì)胞骨架、線粒體網(wǎng)絡(luò)等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的高精度觀測。SIM成像依賴于多幀不同相位和方向的條紋圖像進(jìn)行傅里葉域重建,因此對相機(jī)采集速度、信噪比、視場均有要求。千眼狼sCMOS相機(jī)Gloria 4.2具備95%峰值量子效率與1.2 e-讀出噪聲,確保低光毒性下獲得高信噪比的原始圖像,2048×2048分辨率下>100 fps高速采集能力,有效覆蓋更大細(xì)胞區(qū)域并降低運動偽影。

某實驗將高量子效率的Gloria 4.2科學(xué)相機(jī)集成于SIM超分辨顯微系統(tǒng),實現(xiàn)100 fps下對細(xì)胞樣本的百納米級分辨率成像,突破衍射極限,清晰可辨微管纖維分支點、交叉形態(tài)等(見圖1)。

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圖1

2單分子熒光成像

單分子熒光成像是研究蛋白質(zhì)動態(tài)、DNA-蛋白互作、膜受體擴(kuò)散等分子生物學(xué)過程的核心技術(shù)。成像核心挑戰(zhàn)在于單分子發(fā)射光子數(shù)僅20~30光子水平,信號極易被探測器噪聲淹沒。

中科君達(dá)視界提供的千眼狼sCMOS相機(jī) Gloria 1605,通過工藝和電路設(shè)計優(yōu)化,讀出噪聲已降至0.9 e-水平,并在實時噪聲抑制算法加持下進(jìn)一步消除背景干擾,捕捉到清晰的僅20光子級別的單分子熒光信號,見圖2。

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圖2

3寬場熒光成像

寬場熒光成像是生命科學(xué)研究中最基礎(chǔ)、應(yīng)用最廣的成像模態(tài),適用于細(xì)胞標(biāo)記、亞細(xì)胞器定位、基因表達(dá)分析等場景。千眼狼Gloria系列sCMOS相機(jī)已應(yīng)用于轉(zhuǎn)盤共聚焦、光片顯微鏡、流式細(xì)胞儀等多種寬場成像系統(tǒng),其靈敏度、均衡性、穩(wěn)定性已得到實踐驗證,見圖3。

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圖3

千眼狼sCMOS相機(jī)正通過高量子效率、低讀出噪聲、視野與幀率的均衡結(jié)合,改變細(xì)胞與生物成像的技術(shù)格局:SIM超分辨率成像,大視場與高幀率保障了計算重建精度與效率;單分子熒光成像,低讀出噪聲與高量子效率實現(xiàn)了20光子級別極弱信號的捕獲;寬場熒光成像,均衡的綜合性能支撐了活細(xì)胞長時間高動態(tài)觀測…千眼狼科學(xué)儀器將繼續(xù)鉆研先進(jìn)成像技術(shù),為細(xì)胞與生物成像領(lǐng)域研究提供高效精準(zhǔn)的科學(xué)成像解決方案。


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